የሞዲክ ለውጦችን የእንስሳት ሞዴል ለመፍጠር አውቶሎገስ ኒውክሊየስ ፑልፖሰስ በወገብ ንዑስ ቾንድራል አጥንት ውስጥ ተተክሏል

Nature.comን ስለጎበኙ እናመሰግናለን። የሚጠቀሙበት የአሳሽ ስሪት የተወሰነ የCSS ድጋፍ አለው። ለተሻለ ውጤት፣ አዲስ አሳሽ (ወይም በኢንተርኔት ኤክስፕሎረር ውስጥ የተኳሃኝነት ሁነታን ማሰናከል) እንዲጠቀሙ እንመክራለን። እስከዚያው ድረስ፣ ቀጣይነት ያለው ድጋፍ ለማረጋገጥ፣ ጣቢያውን ያለ ቅጦች እና ጃቫስክሪፕት እናሳያለን።
የእንስሳት ሞዲክ ለውጥ ሞዴሎችን ማቋቋም (MC) ለኤምሲ ለማጥናት አስፈላጊ መሠረት ነው። ሃምሳ አራት የኒውዚላንድ ነጭ ጥንቸሎች በሻም-ኦፕሬሽን ቡድን፣ የጡንቻ ተከላ ቡድን (ME ቡድን) እና የኒውክሊየስ ፑልፖሰስ ተከላ ቡድን (NPE ቡድን) ተከፍለዋል። በኤንፒኢ ቡድን ውስጥ የኢንተርቬቴብራል ዲስክ በአንቴሮላተራል የወገብ ቀዶ ጥገና አቀራረብ ተጋልጦ የኤል5 አከርካሪ አካልን በመጨረሻው ሳህን አጠገብ ለመበሳት መርፌ ጥቅም ላይ ውሏል። ኤንፒ ከኤል1/2 ኢንተርቬቴብራል ዲስክ በመርፌ ተወግቶ ወደ ውስጥ ተወጋ። በንዑስ ቾንድራል አጥንት ውስጥ ቀዳዳ መቆፈር። በጡንቻ ተከላ ቡድን እና በሻም-ኦፕሬሽን ቡድን ውስጥ የቀዶ ጥገና ሂደቶች እና የቁፋሮ ዘዴዎች በኤንፒ ተከላ ቡድን ውስጥ ካሉት ጋር ተመሳሳይ ነበሩ። በኤምኢ ቡድን ውስጥ አንድ የጡንቻ ቁራጭ ወደ ቀዳዳው ውስጥ ተተክሏል፣ በሻም-ኦፕሬሽን ቡድን ውስጥ ምንም ነገር ወደ ቀዳዳው ውስጥ አልገባም። ከቀዶ ጥገናው በኋላ የኤምአርአይ ቅኝት እና የሞለኪውላር ባዮሎጂካል ምርመራ ተካሂዷል። በኤንፒኢ ቡድን ውስጥ ያለው ምልክት ተቀይሯል፣ ነገር ግን በሻም-ኦፕሬሽን ቡድን እና በኤምኢ ቡድን ውስጥ ምንም ግልጽ የምልክት ለውጥ አልነበረም። ሂስቶሎጂካል ምልከታ እንደሚያሳየው በተከላ ቦታ ላይ ያልተለመደ የቲሹ እድገት ታይቷል፣ እና የ IL-4፣ IL-17 እና IFN-γ አገላለጽ በ NPE ቡድን ውስጥ ጨምሯል። የ NP ወደ ንዑስ ቾንድራል አጥንት መትከል የ MC የእንስሳት ሞዴል ሊፈጥር ይችላል።
ሞዲክ ለውጦች (MC) በማግኔቲክ ሬዞናንስ ኢሜጂንግ (MRI) ላይ የሚታዩ የአከርካሪ አጥንት መጨረሻ ሰሌዳዎች እና አጎራባች የአጥንት መቅኒ ቁስሎች ናቸው። እነዚህም ተያያዥ ምልክቶች ባላቸው ግለሰቦች ላይ በጣም የተለመዱ ናቸው። ብዙ ጥናቶች ዝቅተኛ የጀርባ ህመም (LBP)2,3 ስላለው የMC አስፈላጊነት አፅንዖት ሰጥተዋል። ደ ሩስ እና ሌሎችም 4 እና ሞዲክ እና ሌሎችም 5 በመጀመሪያ በአከርካሪ አጥንት መቅኒ ውስጥ ሶስት የተለያዩ የንዑስ ቾንድራል ምልክት ያልተለመዱ ነገሮችን ገለፁ። የሞዲክ አይነት I ለውጦች በT1-weighted (T1W) ቅደም ተከተሎች ላይ ሃይፖይንቴንስ እና በT2-weighted (T2W) ቅደም ተከተሎች ላይ ሃይፖይንቴንስ ናቸው። ይህ ቁስል በአጥንት መቅኒ ውስጥ የፊሸር የመጨረሻ ሰሌዳዎችን እና አጎራባች የደም ሥር ግራኑሌሽን ቲሹን ያሳያል። የሞዲክ አይነት II ለውጦች በሁለቱም በT1W እና በT2W ቅደም ተከተሎች ላይ ከፍተኛ ምልክት ያሳያሉ። በዚህ ዓይነቱ ቁስል ውስጥ የመጨረሻ ሰሌዳ መጥፋት እንዲሁም አጎራባች የአጥንት መቅኒ ሂስቶሎጂካል ስብ መተካት ይቻላል። የሞዲክ አይነት III ለውጦች በT1W እና T2W ቅደም ተከተሎች ውስጥ ዝቅተኛ ምልክት ያሳያሉ። ከመጨረሻ ሰሌዳዎቹ ጋር የሚዛመዱ የስክሌሮቲክ ቁስሎች ታይተዋል6. ኤምሲ የአከርካሪ አጥንት በሽታ እንደሆነ ተደርጎ የሚቆጠር ሲሆን ከብዙ የአከርካሪ አጥንት በሽታዎች ጋር በቅርበት የተቆራኘ ነው።7,8,9.
የሚገኘውን መረጃ ከግምት ውስጥ በማስገባት፣ በርካታ ጥናቶች ስለ ኤምሲ አመጣጥ እና የፓቶሎጂ ዘዴዎች ዝርዝር ግንዛቤዎችን ሰጥተዋል። አልበርት እና ሌሎችም ኤምሲ በዲስክ እብጠት ምክንያት ሊከሰት እንደሚችል ጠቁመዋል8። ሁ እና ሌሎችም ኤምሲ በከባድ የዲስክ መበላሸት ምክንያት እንደሆነ ጠቁመዋል10። ክሮክ “ውስጣዊ የዲስክ መሰንጠቅ” የሚለውን ጽንሰ-ሀሳብ አቅርበዋል፣ ይህም ተደጋጋሚ የዲስክ ጉዳት በመጨረሻው ሳህን ውስጥ ማይክሮ እንባዎችን ሊያስከትል እንደሚችል ይገልጻል። ከተሰነጠቀ በኋላ፣ በኒውክሊየስ ፑልፖሰስ (NP) የሚደርሰው የመጨረሻ ሰሌዳ መጥፋት ራስን የመከላከል ምላሽ ሊያስከትል ይችላል፣ ይህም ወደ MC11 እድገት የበለጠ ይመራል። ማ እና ሌሎችም ተመሳሳይ አመለካከት ነበራቸው እና NP-የተፈጠረ ራስን የመከላከል በሽታ በMC12 በሽታ አምጪነት ውስጥ ቁልፍ ሚና እንደሚጫወት ዘግበዋል።
የበሽታ መከላከያ ስርዓት ሴሎች፣ በተለይም CD4+ T አጋዥ ሊምፎይቶች፣ ራስን የመከላከል አቅምን በማዳከም ሂደት ውስጥ ወሳኝ ሚና ይጫወታሉ13። በቅርቡ የተገኘው Th17 ንዑስ ስብስብ ፕሮኢንፍላማቶሪ ሳይቶኪን IL-17 ያመነጫል፣ የኬሞኪይን አገላለጽን ያበረታታል፣ እና በተጎዱ የአካል ክፍሎች ውስጥ ያሉ የቲ ሴሎችን IFN-γ14 እንዲያመነጩ ያነቃቃል። Th2 ሴሎችም የበሽታ መከላከያ ምላሾችን በማዳከም ሂደት ውስጥ ልዩ ሚና ይጫወታሉ። IL-4 እንደ ተወካይ Th2 ሴል መገለጽ ከባድ የበሽታ መከላከያ ውጤቶችን ሊያስከትል ይችላል15።
በMC16,17,18,19,20,21,22,23,24 ላይ ብዙ ክሊኒካዊ ጥናቶች ቢደረጉም፣ በሰዎች ላይ በተደጋጋሚ የሚከሰተውን የMC ሂደት ሊመስሉ የሚችሉ እና እንደ ኢላማ የተደረገ ሕክምና ያሉ አዳዲስ ሕክምናዎችን ለመመርመር ጥቅም ላይ ሊውሉ የሚችሉ ተስማሚ የእንስሳት የሙከራ ሞዴሎች እጥረት አለ። እስካሁን ድረስ፣ መሰረታዊ የፓቶሎጂ ዘዴዎችን ለማጥናት የተዘገቡት ጥቂት የMC የእንስሳት ሞዴሎች ብቻ ናቸው።
በአልበርት እና ማ ባቀረቡት ራስን የመከላከል ቲዎሪ ላይ በመመስረት፣ ይህ ጥናት በተቆፈረው የአከርካሪ አጥንት ጫፍ ሳህን አቅራቢያ NPን በራስ-ሰር በመተከል ቀላል እና ሊባዛ የሚችል የጥንቸል ኤምሲ ሞዴል አቋቁሟል። ሌሎች ዓላማዎች የእንስሳት ሞዴሎችን ሂስቶሎጂያዊ ባህሪያትን መመልከት እና በኤምሲ እድገት ውስጥ የኤንፒን ልዩ ስልቶች መገምገም ናቸው። ለዚህም፣ የኤምሲን እድገት ለማጥናት እንደ ሞለኪውላር ባዮሎጂ፣ ኤምአርአይ እና ሂስቶሎጂካል ጥናቶች ያሉ ቴክኒኮችን እንጠቀማለን።
ሁለት ጥንቸሎች በቀዶ ጥገና ወቅት ደም በመፍሰሳቸው ሞተዋል፣ አራት ጥንቸሎች ደግሞ በኤምአርአይ ወቅት በማደንዘዣ ምክንያት ሞተዋል። የቀሩት 48 ጥንቸሎች በሕይወት ተርፈዋል እና ከቀዶ ጥገናው በኋላ ምንም አይነት የባህሪ ወይም የነርቭ ምልክት አላሳዩም።
ኤምአርአይ እንደሚያሳየው የተከተተውን ሕብረ ሕዋስ በተለያዩ ቀዳዳዎች ውስጥ ያለው የሲግናል ጥንካሬ የተለየ ነው። በNPE ቡድን ውስጥ ያለው የL5 አከርካሪ አካል የሲግናል ጥንካሬ ከተገባ በኋላ በ12፣ 16 እና 20 ሳምንታት ውስጥ ቀስ በቀስ ተቀየረ (የT1W ቅደም ተከተል ዝቅተኛ ምልክት አሳይቷል፣ እና የT2W ቅደም ተከተል የተቀላቀለ ምልክት እና ዝቅተኛ ምልክት አሳይቷል) (ምስል 1C)፣ የሌሎቹ ሁለት የተከተቱ ክፍሎች የኤምአርአይ እይታ በተመሳሳይ ጊዜ ውስጥ በአንጻራዊ ሁኔታ የተረጋጋ ሆኖ ቆይቷል (ምስል 1A፣ B)።
(ሀ) የጥንቸል ወገብ አከርካሪ በ3 የጊዜ ነጥቦች ላይ የሚወክሉ ተከታታይ MRIs። በሻም-ኦፕሬሽን ቡድን ምስሎች ውስጥ ምንም አይነት የምልክት መዛባት አልተገኘም። (ለ) በME ቡድን ውስጥ ያለው የአከርካሪ አካል የምልክት ባህሪያት ከሻም-ኦፕሬሽን ቡድን ጋር ተመሳሳይ ናቸው፣ እና በጊዜ ሂደት በማካተት ቦታ ላይ ምንም ጉልህ የሆነ የምልክት ለውጥ አልታየም። (ሐ) በNPE ቡድን ውስጥ ዝቅተኛው ምልክት በT1W ቅደም ተከተል ውስጥ በግልጽ ይታያል፣ እና የተቀላቀለው ምልክት እና ዝቅተኛ ምልክት በT2W ቅደም ተከተል ውስጥ በግልጽ ይታያሉ። ከ12-ሳምንት ጊዜ እስከ 20-ሳምንት ጊዜ ድረስ፣ በT2W ቅደም ተከተል ውስጥ ዝቅተኛ ምልክቶችን የሚከቡ አልፎ አልፎ የሚደረጉ ከፍተኛ ምልክቶች ይቀንሳሉ።
ግልጽ የሆነ የአጥንት ሃይፐርፕላዝያ በ NPE ቡድን ውስጥ ባለው የአከርካሪ አካል የተተከለበት ቦታ ላይ ሊታይ ይችላል፣ እና የአጥንት ሃይፐርፕላዝያ ከ NPE ቡድን ጋር ሲነጻጸር ከ12 እስከ 20 ሳምንታት በፍጥነት ይከሰታል (ምስል 2C)፣ በተሞዴሉ የአከርካሪ አካላት ላይ ምንም ጉልህ ለውጥ አልታየም፤ የሻም ቡድን እና የ ME ቡድን (ምስል 2C) 2A፣B)።
(ሀ) በተተከለው ክፍል ላይ ያለው የአከርካሪ አካል ገጽታ በጣም ለስላሳ ነው፣ ቀዳዳው በደንብ ይፈውሳል፣ እና በአከርካሪ አካል ውስጥ ሃይፐርፕላዝያ የለም። (ለ) በME ቡድን ውስጥ የተተከለው ቦታ ቅርፅ ከሻም ኦፕሬሽን ቡድን ጋር ተመሳሳይ ነው፣ እና በጊዜ ሂደት የተተከለው ቦታ ገጽታ ላይ ምንም ግልጽ ለውጥ የለም። (ሐ) የአጥንት ሃይፐርፕላዝያ የተከሰተው በNPE ቡድን ውስጥ በተተከለው ቦታ ላይ ነው። የአጥንት ሃይፐርፕላዝያ በፍጥነት ጨምሯል እና በኢንተርቬቴብራል ዲስክ በኩል እስከ ተቃራኒው የአከርካሪ አካል ድረስ ተዘርግቷል።
ሂስቶሎጂካል ትንተና ስለ አጥንት መፈጠር የበለጠ ዝርዝር መረጃ ይሰጣል። ምስል 3 ከቀዶ ጥገና በኋላ የተነከሩ ክፍሎችን ፎቶግራፎች ያሳያል። በሻም-ኦፕሬሽን ቡድን ውስጥ፣ chondrocytes በጥሩ ሁኔታ የተደረደሩ ሲሆን የሴል መባዛት አልተገኘም (ምስል 3A)። በME ቡድን ውስጥ ያለው ሁኔታ በሻም-ኦፕሬሽን ቡድን ውስጥ ካለው ሁኔታ ጋር ተመሳሳይ ነበር (ምስል 3B)። ሆኖም፣ በNPE ቡድን ውስጥ፣ በተከላ ቦታ ላይ ብዙ ቁጥር ያላቸው chondrocytes እና የ NP-መሰል ሴሎች መስፋፋት ተስተውሏል (ምስል 3C)፤
(ሀ) ትራቤኩላዎች በመጨረሻው ሳህን አጠገብ ሊታዩ ይችላሉ፣ ቾንድሮሳይቶች ወጥ የሆነ የሴል መጠንና ቅርፅ እና ምንም አይነት እድገት የሌላቸው (40 ጊዜ) በጥሩ ሁኔታ የተደረደሩ ናቸው። (ለ) በME ቡድን ውስጥ ያለው የተተከለው ቦታ ሁኔታ ከሻም ቡድን ጋር ተመሳሳይ ነው። ትራቤኩላዎች እና ቾንድሮሳይቶች ሊታዩ ይችላሉ፣ ነገር ግን በተተከለው ቦታ ላይ ምንም ግልጽ የሆነ እድገት የለም (40 ጊዜ)። (ለ) ቾንድሮሳይቶች እና NP የሚመስሉ ሴሎች በከፍተኛ ሁኔታ እንደሚባዙ እና የቾንድሮሳይቶች ቅርፅ እና መጠን እኩል እንዳልሆኑ (40 ጊዜ) ማየት ይቻላል።
የኢንተርሉኪን 4 (IL-4) mRNA፣ የኢንተርሉኪን 17 (IL-17) mRNA እና የኢንተርፌሮን γ (IFN-γ) mRNA አገላለጽ በሁለቱም የNPE እና የME ቡድኖች ውስጥ ታይቷል። የታለሙ ጂኖች አገላለጽ ደረጃዎች ሲነፃፀሩ፣ የIL-4፣ IL-17 እና IFN-γ የጂን አገላለጽ ከME ቡድን እና ከሻም ኦፕሬሽን ቡድን ጋር ሲነጻጸር በNPE ቡድን ውስጥ በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል (ምስል 4) (P < 0.05)። ከሻም ኦፕሬሽን ቡድን ጋር ሲነጻጸር፣ በME ቡድን ውስጥ የIL-4፣ IL-17 እና IFN-γ አገላለጽ ደረጃዎች በትንሹ ብቻ ጨምረዋል እና ወደ ስታቲስቲክስ ለውጥ አልደረሱም (P > 0.05)።
በNPE ቡድን ውስጥ የIL-4፣ IL-17 እና IFN-γ የ mRNA አገላለጽ በሻም ኦፕሬሽን ቡድን እና በME ቡድን ውስጥ ካሉት በእጅጉ የላቀ አዝማሚያ አሳይቷል (P < 0.05)።
በአንጻሩ፣ በME ቡድን ውስጥ ያሉት የመግለጫ ደረጃዎች ምንም ጉልህ ልዩነት አላሳዩም (P>0.05)።
የዌስተርን ብሎት ትንተና የተካሄደው በIL-4 እና IL-17 ላይ በንግድ ላይ የሚገኙ ፀረ እንግዳ አካላትን በመጠቀም የተቀየረውን የ mRNA አገላለጽ ንድፍ ለማረጋገጥ ነው። በምስል 5A፣B ላይ እንደሚታየው፣ ከ ME ቡድን እና ከ sham ኦፕሬሽን ቡድን ጋር ሲነጻጸር፣ በ NPE ቡድን ውስጥ የ IL-4 እና IL-17 የፕሮቲን መጠን በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል (P < 0.05)። ከ sham ኦፕሬሽን ቡድን ጋር ሲነጻጸር፣ በ ME ቡድን ውስጥ የ IL-4 እና IL-17 የፕሮቲን መጠን በስታቲስቲክስ ደረጃ ጉልህ ለውጦችን ማድረግ አልቻለም (P> 0.05)።
(ሀ) በኤንፒኢ ቡድን ውስጥ የIL-4 እና IL-17 የፕሮቲን መጠን ከኤምኢ ቡድን እና ከፕላሴቦ ቡድን ውስጥ ካለው በእጅጉ ከፍ ያለ ነበር (P < 0.05)። (ለ) የዌስተርን ብሎት ሂስቶግራም።
በቀዶ ጥገና ወቅት የተገኙ የሰው ናሙናዎች ውስን በመሆናቸው፣ በኤምሲ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ላይ ግልጽ እና ዝርዝር ጥናቶች በተወሰነ ደረጃ አስቸጋሪ ናቸው። እምቅ የፓቶሎጂ ዘዴዎችን ለማጥናት የኤምሲ የእንስሳት ሞዴል ለማቋቋም ሞክረናል። በተመሳሳይ ጊዜ፣ በኤንፒ አውቶግራፍት የተፈጠረውን የኤምሲ አካሄድ ለመከተል የራዲዮሎጂ ግምገማ፣ ሂስቶሎጂካል ግምገማ እና ሞለኪውላዊ ባዮሎጂካል ግምገማ ጥቅም ላይ ውለዋል። በዚህም ምክንያት፣ የኤንፒ ተከላ ሞዴል ከ12-ሳምንት እስከ 20-ሳምንት የጊዜ ነጥቦች (በT1W ቅደም ተከተሎች ውስጥ የተቀላቀለ ዝቅተኛ ምልክት እና በT2W ቅደም ተከተሎች ውስጥ ዝቅተኛ ምልክት) የምልክት ጥንካሬ ቀስ በቀስ ለውጥ አስከትሏል፣ የቲሹ ለውጦችን ያሳያል፣ እና ሂስቶሎጂካል እና ሞለኪውላዊ ባዮሎጂካል ግምገማዎች የራዲዮሎጂ ጥናት ውጤቶችን አረጋግጠዋል።
የዚህ ሙከራ ውጤቶች እንደሚያሳዩት በNPE ቡድን ውስጥ የአከርካሪ አጥንት ጉዳት በደረሰበት ቦታ ላይ የእይታ እና የሂስቶሎጂ ለውጦች ተከስተዋል። በተመሳሳይ ጊዜ የIL-4፣ IL-17 እና IFN-γ ጂኖች እንዲሁም የIL-4፣ IL-17 እና IFN-γ አገላለጽ ታይቷል፣ ይህም በአከርካሪ አካል ውስጥ የራስ-ሰር ኒውክሊየስ ፑልፖሰስ ቲሹ መጣስ ተከታታይ የምልክት እና የሞርፎሎጂ ለውጦችን ሊያስከትል እንደሚችል ያሳያል። የእንስሳት ሞዴል የአከርካሪ አካላት የምልክት ባህሪያት (በT1W ቅደም ተከተል ዝቅተኛ ምልክት፣ የተቀላቀለ ምልክት እና ዝቅተኛ ምልክት በT2W ቅደም ተከተል) ከሰው የአከርካሪ ሴሎች ጋር በጣም ተመሳሳይ መሆናቸውን ማግኘት ቀላል ነው፣ እና የኤምአርአይ ባህሪያት የሂስቶሎጂ እና አጠቃላይ የሰውነት አካል ምልከታዎችን ያረጋግጣሉ፣ ማለትም በአከርካሪ አካል ሴሎች ላይ የሚከሰቱ ለውጦች ተራማጅ ናቸው። በአሰቃቂ ጉዳት ምክንያት የሚፈጠረው እብጠት ምላሽ ከቀዶ ጥገና በኋላ ብዙም ሳይቆይ ሊታይ ቢችልም፣ የኤምአርአይ ውጤቶች እንደሚያሳዩት ቀስ በቀስ እየጨመረ የሚሄድ የምልክት ለውጦች ከቀዶ ጥገናው ከ12 ሳምንታት በኋላ ታይተው እስከ 20 ሳምንታት ድረስ የቆዩ ሲሆን ምንም አይነት የማገገም ወይም የኤምአርአይ ለውጦች የመቀልበስ ምልክቶች ሳይኖሩባቸው እስከ 20 ሳምንታት ድረስ ቆይተዋል። እነዚህ ውጤቶች እንደሚያሳዩት የራስ-ሰር የጀርባ አጥንት NP ጥንቸሎች ውስጥ ፕሮግረሲቭ MV ለመመስረት አስተማማኝ ዘዴ ነው።
ይህ የመበሳት ሞዴል በቂ ክህሎት፣ ጊዜ እና የቀዶ ጥገና ጥረት ይጠይቃል። በቅድመ ሙከራዎች፣ የፓራቨርቴብራል ጅማቶች መዋቅሮች መቆራረጥ ወይም ከመጠን በላይ ማነቃቂያ የአከርካሪ አጥንት ኦስቲዮፊቶች እንዲፈጠሩ ሊያደርግ ይችላል። አጎራባች ዲስኮችን እንዳይጎዱ ወይም እንዳያበሳጩ ጥንቃቄ መደረግ አለበት። ወጥ የሆነ እና ሊባዙ የሚችሉ ውጤቶችን ለማግኘት የመግባት ጥልቀት ቁጥጥር ሊደረግበት ስለሚችል፣ የ3 ሚሊ ሜትር ርዝመት ያለው መርፌ ሽፋን በመቁረጥ መሰኪያ በእጅ ሠራን። ይህንን መሰኪያ መጠቀም በአከርካሪ አካል ውስጥ ወጥ የሆነ የመቆፈሪያ ጥልቀት ያረጋግጣል። በቅድመ ሙከራዎች፣ በቀዶ ጥገናው ውስጥ የተሳተፉ ሶስት የአጥንት ቀዶ ጥገና ሐኪሞች ከ18-መለኪያ መርፌዎች ወይም ከሌሎች ዘዴዎች ይልቅ 16-መለኪያ መርፌዎች ለመስራት ቀላል ሆነው አግኝተዋል። በመቆፈሪያ ጊዜ ከመጠን በላይ ደም መፍሰስን ለማስወገድ መርፌውን ለተወሰነ ጊዜ ማቆየት የበለጠ ተስማሚ የሆነ የማስገቢያ ቀዳዳ ይሰጣል፣ ይህም የተወሰነ የ MC ደረጃ በዚህ መንገድ ቁጥጥር ሊደረግበት እንደሚችል ይጠቁማል።
ምንም እንኳን ብዙ ጥናቶች MCን ያነጣጠሩ ቢሆኑም፣ ስለ MC25,26,27 መንስኤ እና በሽታ አምጪነት ብዙም የሚታወቅ ነገር የለም። ቀደም ሲል ባደረግናቸው ጥናቶች መሠረት፣ ራስን የመከላከል አቅም በMC12 መከሰት እና እድገት ውስጥ ቁልፍ ሚና እንደሚጫወት ደርሰንበታል። ይህ ጥናት የIL-4፣ IL-17 እና IFN-γን ቁጥራዊ አገላለጽ መርምሯል፣ እነዚህም አንቲጂን ማነቃቂያ ከተደረገ በኋላ የCD4+ ሴሎች ዋና ዋና የመለያየት መንገዶች ናቸው። በጥናታችን፣ ከአሉታዊው ቡድን ጋር ሲነጻጸር፣ የNPE ቡድን ከፍተኛ የIL-4፣ IL-17 እና IFN-γ አገላለጽ ነበረው፣ እና የIL-4 እና IL-17 የፕሮቲን መጠንም ከፍ ያለ ነበር።
በክሊኒካዊ መልኩ፣ የ IL-17 mRNA አገላለጽ በ NP ሴሎች ውስጥ ከዲስክ እብጠቶች ጋር ሲነጻጸር ይጨምራል28። ከጤናማ መቆጣጠሪያዎች ጋር ሲነጻጸር አጣዳፊ ያልሆነ ጨመቃ የዲስክ እብጠት ሞዴል ውስጥ የ IL-4 እና IFN-γ አገላለጽ መጠን መጨመርም ተገኝቷል29። IL-17 በኢንፌክሽን፣ በቲሹ ጉዳት ራስን በራስ የማከም በሽታዎች ውስጥ ቁልፍ ሚና ይጫወታል30 እና ለ IFN-γ31 የበሽታ መከላከያ ምላሽን ያሻሽላል። የተሻሻለ የ IL-17-መካከለኛ የቲሹ ጉዳት በ MRL/lpr አይጦች32 እና በራስ የመከላከል ተጋላጭ በሆኑ አይጦች33 ውስጥ ሪፖርት ተደርጓል። IL-4 ፕሮኢንፍላማቶሪ ሳይቶኪንስ (እንደ IL-1β እና TNFα ያሉ) እና ማክሮፋጅ ማግበር34 አገላለጽን ሊገታ ይችላል። የ IL-4 mRNA አገላለጽ በተመሳሳይ ጊዜ ከ IL-17 እና IFN-γ ጋር ሲነጻጸር በ NPE ቡድን ውስጥ የተለየ እንደነበር ተዘግቧል፤ በ NPE ቡድን ውስጥ የ IFN-γ mRNA አገላለጽ ከሌሎች ቡድኖች በእጅጉ ከፍ ያለ ነበር። ስለዚህ፣ የ IFN-γ ምርት በ NP መገጣጠሚያ ምክንያት የሚፈጠረውን የእብጠት ምላሽ አስታራቂ ሊሆን ይችላል። ጥናቶች እንደሚያሳዩት IFN-γ በበርካታ የሴል ዓይነቶች የሚመረተው እንደ activated type 1 helper T cells፣ natural killer cells እና macrophages 35,36 ያሉ ሲሆን የበሽታ መከላከያ ምላሾችን የሚያበረታታ ቁልፍ ፀረ-ኢንፍላማቶሪ ሳይቶኪን ነው።
ይህ ጥናት ራስን የመከላከል ምላሽ በኤምሲ መከሰት እና እድገት ውስጥ ሊሳተፍ እንደሚችል ይጠቁማል። ሉማ እና ሌሎችም የኤምሲ እና ታዋቂው ኤንፒ የምልክት ባህሪያት በኤምአርአይ ላይ ተመሳሳይ መሆናቸውን እና ሁለቱም በT2W ቅደም ተከተል38 ውስጥ ከፍተኛ ምልክት ያሳያሉ። አንዳንድ ሳይቶኪኖች እንደ IL-139 ካሉ የኤምሲ መከሰት ጋር በቅርበት የተቆራኙ መሆናቸውን አረጋግጠዋል። ማ እና ሌሎችም የኤንፒ ወደ ላይ ወይም ወደ ታች መውጣት በኤምሲ12 መከሰት እና እድገት ላይ ትልቅ ተጽዕኖ ሊያሳድር እንደሚችል ጠቁመዋል። ቦቤችኮ40 እና ሄርዝቤይን እና ሌሎችም 41 NP ከተወለደበት ጊዜ ጀምሮ ወደ ደም ስርአት ውስጥ መግባት የማይችል የበሽታ መከላከያ ቲሹ መሆኑን ዘግበዋል። የኤንፒ ፕሮቱሲዎች የውጭ አካላትን ወደ ደም አቅርቦት ውስጥ ያስተዋውቃሉ፣ በዚህም የአካባቢ ራስን የመከላከል ምላሾችን ያስታግሳሉ42። ራስን የመከላከል ምላሾች ብዙ የበሽታ መከላከያ ምክንያቶችን ሊያስከትሉ ይችላሉ፣ እና እነዚህ ምክንያቶች ለቲሹዎች ያለማቋረጥ ሲጋለጡ፣ በምልክት ላይ ለውጦችን ሊያስከትሉ ይችላሉ43። በዚህ ጥናት፣ የIL-4፣ IL-17 እና IFN-γ ከመጠን በላይ መጋለጥ የተለመዱ የበሽታ መከላከያ ምክንያቶች ናቸው፣ ይህም በNP እና MCs44 መካከል ያለውን የጠበቀ ግንኙነት የበለጠ ያረጋግጣል። ይህ የእንስሳት ሞዴል የNP ግኝትን እና ወደ መጨረሻው ሳህን መግባትን በጥሩ ሁኔታ ይኮርጃል። ይህ ሂደት ራስን የመከላከል አቅም በኤምሲ ላይ ያለውን ተጽእኖ የበለጠ አሳይቷል።
እንደተጠበቀው፣ ይህ የእንስሳት ሞዴል ኤምሲን ለማጥናት የሚያስችል መድረክ ይሰጠናል። ሆኖም፣ ይህ ሞዴል አሁንም አንዳንድ ገደቦች አሉት፡ በመጀመሪያ፣ በእንስሳት ምልከታ ደረጃ፣ አንዳንድ መካከለኛ ደረጃ ያላቸው ጥንቸሎች ለሂስቶሎጂካል እና ሞለኪውላር ባዮሎጂ ምርመራ እንዲሞቱ መደረግ አለባቸው፣ ስለዚህ አንዳንድ እንስሳት በጊዜ ሂደት "ከአገልግሎት ውጪ ይሆናሉ"። በሁለተኛ ደረጃ፣ በዚህ ጥናት ውስጥ ሦስት የጊዜ ነጥቦች የተቀመጡ ቢሆኑም፣ በሚያሳዝን ሁኔታ፣ አንድ ዓይነት ኤምሲ (ሞዲክ ዓይነት I ለውጥ) ብቻ ሞዴሊንግ አድርገናል፣ ስለዚህ የሰውን በሽታ እድገት ሂደት ለመወከል በቂ አይደለም፣ እና ሁሉንም የምልክት ለውጦችን በተሻለ ሁኔታ ለመመልከት ተጨማሪ የጊዜ ነጥቦች መዘጋጀት አለባቸው። በሶስተኛ ደረጃ፣ በቲሹ አወቃቀር ላይ የተደረጉ ለውጦች በሂስቶሎጂካል ቀለም በግልጽ ሊታዩ ይችላሉ፣ ነገር ግን አንዳንድ ልዩ ቴክኒኮች በዚህ ሞዴል ውስጥ ያሉትን ማይክሮ መዋቅራዊ ለውጦችን በተሻለ ሁኔታ ሊያሳዩ ይችላሉ። ለምሳሌ፣ በራቢ ኢንተርቬቴብራል ዲስኮች ውስጥ የፋይብሮካርቲሌጅ ምስረታ ለመተንተን ፖላራይዝድ የብርሃን ማይክሮስኮፒ ጥቅም ላይ ውሏል45። የኤንፒ የረጅም ጊዜ ተፅእኖዎች በኤምሲ እና በመጨረሻ ሰሌዳ ላይ ተጨማሪ ጥናት ያስፈልጋቸዋል።
ሃምሳ አራት ወንድ የኒውዚላንድ ነጭ ጥንቸሎች (ክብደታቸው ከ2.5-3 ኪ.ግ አካባቢ፣ ከ3-3.5 ወር ዕድሜ ያላቸው) በዘፈቀደ ወደ አስመሳይ የቀዶ ጥገና ቡድን፣ የጡንቻ ተከላ ቡድን (ME ቡድን) እና የነርቭ ሥር ተከላ ቡድን (NPE ቡድን) ተከፍለዋል። ሁሉም የሙከራ ሂደቶች በቲያንጂን ሆስፒታል የሥነ ምግባር ኮሚቴ ጸድቀዋል፣ እና የሙከራ ዘዴዎቹ በጸደቁት መመሪያዎች መሠረት በጥብቅ ተከናውነዋል።
በኤስ. ሶባጂማ 46 የቀዶ ጥገና ቴክኒክ ላይ አንዳንድ ማሻሻያዎች ተደርገዋል። እያንዳንዱ ጥንቸል በጎን በኩል በሚተኛበት ቦታ ላይ ተቀመጠ እና የአምስት ተከታታይ የወገብ ኢንተርቬቴብራል ዲስኮች (IVDs) የፊት ገጽ በፖስተርላተራል ሪትሮፔሪቶናል አቀራረብ ተጋልጧል። እያንዳንዱ ጥንቸል አጠቃላይ ማደንዘዣ (20% ዩሬቴን፣ 5 ሚሊ ሊትር/ኪ.ግ. በጆሮ ደም ስር በኩል) ተሰጥቶታል። ከጎድን አጥንቶች የታችኛው ጠርዝ እስከ ዳሌ ጠርዝ፣ 2 ሴ.ሜ ventral እስከ ፓራቨርቴብራል ጡንቻዎች ድረስ ቁመታዊ የቆዳ መቆረጥ ተከናውኗል። ከL1 እስከ L6 ያለው የቀኝ አንቴሮሌተራል አከርካሪ በላይ ባለው የከርሰ ምድር ቲሹ፣ የሬትሮፔሪቶናል ቲሹ እና ጡንቻዎች ላይ ስለታም እና ጥርት ብሎ በመቁረጥ ተጋልጧል (ምስል 6A)። የዲስክ ደረጃው የሚወሰነው የዳሌ ጠርዝን እንደ የL5-L6 ዲስክ ደረጃ አናቶሚክ ምልክት በመጠቀም ነው። በL5 vertebra መጨረሻ ሳህን አጠገብ ቀዳዳ ለመቆፈር 16-ጋጅ መርፌን ይጠቀሙ (ምስል 6B)። በL1-L2 ኢንተርቬቴብራል ዲስክ ውስጥ ያለውን አውቶሎገስ ኒውክሊየስ ፑልፖሰስ ለመምጠጥ 5-ሚሊ ሊትር መርፌ ይጠቀሙ (ምስል 6C)። የኒውክሊየስ ፑልፖሰስን ወይም ጡንቻን በእያንዳንዱ ቡድን መስፈርቶች መሠረት ያስወግዱ። የቁፋሮ ቀዳዳው ጥልቀት ከጨመረ በኋላ፣ በጥልቅ ፋሺያ፣ ላዩን ፋሺያ እና ቆዳ ላይ የሚዋጡ ስፌቶች በቀዶ ጥገና ወቅት የአከርካሪ አጥንት አካል ፔሪዮስቴያል ቲሹ እንዳይጎዱ ጥንቃቄ ያደርጋሉ።
(ሀ) የL5–L6 ዲስክ በፖስተርላተራል ሪትሮኒየል አቀራረብ በኩል ይጋለጣል። (ለ) በL5 መጨረሻ ሰሌዳ አጠገብ ቀዳዳ ለመቆፈር የ16-ጋጅ መርፌ ይጠቀሙ። (ሐ) አውቶማቲክ ኤምኤፍዎች ይሰበሰባሉ።
አጠቃላይ ማደንዘዣ በጆሮ ደም ስር በኩል 20% ዩሬቴን (5 ሚሊ ሊትር/ኪ.ግ) በመስጠት ተደረገ፣ እና ከወገብ አከርካሪ አጥንት ራዲዮግራፎች ከቀዶ ጥገናው በኋላ በ12፣ 16 እና 20 ሳምንታት ተደግመዋል።
ጥንቸሎች ቀዶ ጥገና ከተደረገላቸው በኋላ በ12፣ 16 እና 20 ሳምንታት ውስጥ ኬታሚን (25.0 ሚ.ግ./ኪ.ግ) እና በደም ሥር ሶዲየም ፔንቶባርቢታል (1.2 ግ/ኪ.ግ) በመርፌ ተገድለዋል። መላው የአከርካሪ አጥንት ለሂስቶሎጂካል ትንተና ተወግዶ እውነተኛ ትንተና ተካሂዷል። የበሽታ መከላከያ ምክንያቶችን ለውጦች ለመለየት የቁጥር ተገላቢጦሽ ግልባጭ (RT-qPCR) እና ዌስተርን ብሎቲንግ ጥቅም ላይ ውለዋል።
የኤምአርአይ ምርመራዎች የተከናወኑት ጥንቸሎች በ3.0 T ክሊኒካል ማግኔት (GE Medical Systems፣ Florence፣ SC) ኦርቶጎናል ሊምብ ኮይል ተቀባይ የተገጠመላቸው ናቸው። ጥንቸሎች በጆሮ ደም ስር በኩል በ20% ዩሬቴን (5 ሚሊ ሊትር/ኪ.ግ) ሰመመን ተሰጥቷቸው ከዚያም በ5 ኢንች ዲያሜትር ክብ ወለል ኮይል (GE Medical Systems) ላይ ያተኮረ የወገብ ክልል ባለው ማግኔት ውስጥ ተኝተው ተቀምጠዋል። ከL3–L4 እስከ L5–L6 የወገብ ዲስክ ያለበትን ቦታ ለመለየት የኮሮናል T2-weighted localizer ምስሎች (TR፣ 1445 ms፤ TE፣ 37 ms) ተገኝተዋል። የሳጊትታል ፕላን T2-weighted ቁርጥራጮች በሚከተሉት ቅንብሮች ተገኝተዋል፡ ፈጣን የስፒን-ኢኮ ቅደም ተከተል በ2200 ms ድግግሞሽ ጊዜ (TR) እና 70 ms የኢኮ ጊዜ (TE)፣ ማትሪክስ፤ የ260 እና የስምንት ማነቃቂያዎች የእይታ መስክ፤ የመቁረጫው ውፍረት 2 ሚሜ ነበር፣ ክፍተቱ 0.2 ሚሜ ነበር።
የመጨረሻው ፎቶግራፍ ከተነሳና የመጨረሻው ጥንቸል ከተገደለ በኋላ፣ የሻም፣ የጡንቻ እና የNP ዲስኮች ለሂስቶሎጂካል ምርመራ ተወግደዋል። ሕብረ ሕዋሳቱ ለ1 ሳምንት በ10% ገለልተኛ በሆነ ፎራሚሊን ውስጥ ተስተካክለው፣ ከኤቲሊንዲአሚንቴትራአሴቲክ አሲድ ጋር ተቆርጠው ፓራፊን ተከፋፍለዋል። የሕብረ ሕዋሳቱ ብሎኮች በፓራፊን ውስጥ ተክተው በማይክሮቶም በመጠቀም ወደ ሳጊታል ክፍሎች (5 μm ውፍረት) ተቆርጠዋል። ክፍሎቹ በሄማቶክሲሊን እና ኢኦሲን (ኤች ኤንድ ኢ) ተቀባ።
በእያንዳንዱ ቡድን ውስጥ ካሉት ጥንቸሎች የኢንተርቬቴብራል ዲስኮችን ከሰበሰበ በኋላ፣ በአምራቹ መመሪያ እና በImProm II የተገላቢጦሽ ትራንስክሪፕሽን ሲስተም (Promega Inc.፣ Madison፣ WI፣ USA) መሠረት አጠቃላይ አር ኤን ኤ በUNIQ-10 አምድ (Shanghai Sangon Biotechnology Co., Ltd., China) በመጠቀም ተወግዷል። የተገላቢጦሽ ትራንስክሪፕሽን ተካሂዷል።
RT-qPCR የተከናወነው በአምራቹ መመሪያ መሠረት ፕሪዝም 7300 (አፕሊድ ባዮሲስተምስ ኢንክ.፣ ዩኤስኤ) እና SYBR Green Jump Start Taq ReadyMix (ሲግማ-አልድሪች፣ ሴንት ሉዊስ፣ ኤምኦ፣ ዩኤስኤ) በመጠቀም ነው። የPCR ምላሽ መጠን 20 μl ሲሆን 1.5 μl የተደባለቀ cDNA እና 0.2 μM የእያንዳንዱ ፕሪመር ይዟል። ፕሪመሮች የተነደፉት በኦሊጎፐርፌክት ዲዛይነር (ኢንቪትሮጅን፣ ቫሌንሲያ፣ ካሊፎርኒያ) ሲሆን በናንጂንግ ጎልደን ስቱዋርት ባዮቴክኖሎጂ ኩባንያ፣ ሊሚትድ (ቻይና) (ሠንጠረዥ 1) ነው የተመረተው። የሚከተሉት የሙቀት ዑደት ሁኔታዎች ጥቅም ላይ ውለዋል፡ የመጀመሪያ የፖሊሜሬዝ ማግበር ደረጃ በ94°ሴ ለ2 ደቂቃዎች፣ ከዚያም በ94°ሴ ለ40 ሰከንዶች ዑደቶች ለቴምፕል ዲናቱሬሽን፣ በ60°ሴ ለ1 ደቂቃ ማቃጠል፣ ማራዘሚያ እና ፍሎረሰንስ። መለኪያዎች ለ1 ደቂቃ በ72°ሴ ተከናውነዋል። ሁሉም ናሙናዎች ሶስት ጊዜ ተጨምረዋል እና አማካይ እሴቱ ለRT-qPCR ትንተና ጥቅም ላይ ውሏል። የማጉላት መረጃ FlexStation 3 (ሞለኪውላር መሳሪያዎች፣ ሰኒቫሌ፣ ካሊፎርኒያ፣ አሜሪካ) በመጠቀም ተተነተነ። IL-4፣ IL-17 እና IFN-γ የጂን አገላለጽ ወደ ኢንዶጅናል ቁጥጥር (ACTB) መደበኛ ሆነዋል። የዒላማ mRNA አንጻራዊ አገላለጽ ደረጃዎች የተሰሉት በ2-ΔΔCT ዘዴ ነው።
ጠቅላላ ፕሮቲን ከቲሹዎች የተወሰደው በRIPA lysis buffer ውስጥ ባለው የቲሹ ሆሞጀኒዘር (ፕሮቲኤዝ እና ፎስፋታሴ አጋቾች ኮክቴል የያዘ) በመጠቀም ሲሆን ከዚያም በ4°ሴ በ13,000 rpm ለ20 ደቂቃ በሴንትሪፉጅ ተደርገዋል። በአንድ መስመር ሃምሳ ማይክሮግራም ፕሮቲን ተጭኖ በ10% SDS-PAGE ተለያይቶ ከዚያም ወደ PVDF ሽፋን ተላልፏል። በክፍል ሙቀት ውስጥ ለ1 ሰዓት 0.1% Tween 20 የያዘውን ትሪስ-ቡፈርድ ሳላይን (TBS) ውስጥ 5% ቅባት የሌለው ደረቅ ወተት ውስጥ እገዳ ተከናውኗል። ሽፋኑ በ4°ሴ በአንድ ሌሊት ጥንቸል ፀረ-ዲኮሪን ፕራይመሪ ፀረ-ፀረ ... በክፍል ሙቀት ውስጥ ለ1 ሰዓት ከሆርሴዲስ ፔሮክሲዳዝ (ቦስተር፣ ዉሃን፣ ቻይና) ጋር በሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካል (የፍየል ፀረ-ጥንቸል ኢሚውኖግሎቡሊን G በ1፡40,000 ዲሉሽን) ጋር ተደምሮ። የዌስተርን ብሎት ምልክቶች የተገኙት በኤክስሬይ ጨረር ከተደረገ በኋላ በኬሚሉሚኒሰንት ሽፋን ላይ ባለው የኬሚሉሚኒሰንት ሽፋን መጨመር ነው። ለዴንሲቶሜትሪክ ትንተና፣ ብሎቶች በBandScan ሶፍትዌር በመጠቀም ተቃኝተው መለካት ችለዋል፣ እና ውጤቶቹ እንደ ኢላማ ጂን ኢሚውኖሬአክቲቭነት ከቱቡሊን ኢሚውኖሬአክቲቭነት ጋር ሲነጻጸር ተገልጸዋል።
የስታቲስቲክስ ስሌቶች የተከናወኑት በSPSS16.0 የሶፍትዌር ፓኬጅ (SPSS፣ ዩኤስኤ) በመጠቀም ነው። በጥናቱ ወቅት የተሰበሰቡ መረጃዎች እንደ አማካኝ ± መደበኛ መዛባት (አማካይ ± SD) ተገልጸው በሁለቱ ቡድኖች መካከል ያለውን ልዩነት ለመለየት የአንድ-መንገድ ተደጋጋሚ መለኪያዎች የልዩነት ትንተና (ANOVA) በመጠቀም ተተነተኑ። P < 0.05 በስታቲስቲክስ ጉልህ እንደሆነ ተደርጎ ይቆጠራል።
ስለዚህ፣ የራስ-ሰር NPs ወደ አከርካሪ አካል ውስጥ በመትከል እና ማክሮአናቶሚካል ምልከታ፣ ኤምአርአይ ትንተና፣ ሂስቶሎጂካል ግምገማ እና ሞለኪውላር ባዮሎጂካል ትንተና በማድረግ የኤምሲ የእንስሳት ሞዴል መመስረት የሰውን ኤምሲ ዘዴዎች ለመገምገም እና ለመረዳት እና አዳዲስ የሕክምና ጣልቃ ገብነቶችን ለማዘጋጀት አስፈላጊ መሣሪያ ሊሆን ይችላል።
ይህንን ጽሑፍ እንዴት መጥቀስ ይቻላል፡ ሃን፣ ሲ. እና ሌሎችም። የሞዲክ ለውጦች የእንስሳት ሞዴል የተመሰረተው የራስ-ሰር ኒውክሊየስ ፑልፖሰስን በወገብ አከርካሪ ንዑስ ቾንድራል አጥንት ውስጥ በመትከል ነው። Sci. Rep. 6, 35102: 10.1038/srep35102 (2016)።
ዌይሻፕት፣ ዲ.፣ ዛኔቲ፣ ኤም.፣ ሆድለር፣ ጄ.፣ እና ቡስ፣ ኤን. የወገብ አከርካሪ መግነጢሳዊ ሬዞናንስ ኢሜጂንግ፡ የዲስክ ሄርኒሽን እና ማቆየት ስርጭት፣ የነርቭ ሥር መጭመቅ፣ የመጨረሻ ሳህን ያልተለመዱ ነገሮች፣ እና ምልክት በሌላቸው በጎ ፈቃደኞች ላይ የፊት መገጣጠሚያ ኦስቲኦኮሮርስሲስ። ተመን። ራዲዮሎጂ 209፣ 661–666፣ doi:10.1148/ራዲዮሎጂ.209.3.9844656 (1998)።
ኬጄር፣ ፒ.፣ ኮርሾልም፣ ኤል.፣ ቤንዲክስ፣ ቲ.፣ ሶረንሰን፣ ጄኤስ እና ሌቦውፍ-ኢድ፣ ኬ. ሞዲክ ለውጦች እና ከክሊኒካዊ ግኝቶች ጋር ያላቸው ግንኙነት። የአውሮፓ የአከርካሪ አጥንት ጆርናል፡ የአውሮፓ የአከርካሪ አጥንት ማህበር፣ የአውሮፓ የአከርካሪ አጥንት መበላሸት ማህበር እና የአውሮፓ የሰርቪካል አከርካሪ ምርምር ማህበር ይፋዊ ህትመት 15፣ 1312–1319፣ doi: 10.1007/s00586-006-0185-x (2006)።
ኩይስማ፣ ኤም.፣ እና ሌሎችም። በወገብ አከርካሪ ጫፍ ላይ ያሉ ሞዲክ ለውጦች፡- በመካከለኛ ዕድሜ ላይ ባሉ ወንዶች ላይ የበሽታው ስርጭት እና ከዝቅተኛ የጀርባ ህመም እና ከሳይያቲካ ጋር ያለው ግንኙነት። አከርካሪ 32፣ 1116–1122፣ doi:10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007)።
ደ ሩስ፣ ኤ.፣ ክሬሰል፣ ኤች.፣ ስፕሪትዘር፣ ኬ.፣ እና ዳሊንካ፣ ኤም. የጡንቻ መቅኒ የመጨረሻ ሳህን አጠገብ የMRI ለውጦች በወገብ አከርካሪ ላይ በሚዛባ በሽታ። AJR. የአሜሪካ የራዲዮሎጂ ጆርናል 149፣ 531–534፣ doi: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987)።
ሞዲክ፣ ኤምቲ፣ ስቴይንበርግ፣ ፒኤም፣ ሮስ፣ ጄኤስ፣ ማሳሪክ፣ ቲጄ እና ካርተር፣ ጄአር የመበስበስ ዲስክ በሽታ፡ የአከርካሪ አጥንቶች ለውጦች በኤምአርአይ ግምገማ። ራዲዮሎጂ 166፣ 193–199፣ doi:10.1148/ራዲዮሎጂ.166.1.3336678 (1988)።
ሞዲክ፣ ኤምቲ፣ ማሳሪክ፣ ቲጄ፣ ሮስ፣ ጄኤስ እና ካርተር፣ ጄአር የተበላሸ ዲስክ በሽታ ምስል። ራዲዮሎጂ 168፣ 177–186፣ doi: 10.1148/ራዲዮሎጂ.168.1.3289089 (1988)።
ጄንሰን፣ ቲኤስ፣ እና ሌሎችም። የኒዮቨርቴብራል ጫፍ ሰሌዳ (ሞዲክ) የምልክት ለውጦች ትንበያዎች በአጠቃላይ ህዝብ ላይ። የአውሮፓ የአከርካሪ አጥንት ጆርናል፡ የአውሮፓ የአከርካሪ አጥንት ማህበር፣ የአውሮፓ የአከርካሪ አጥንት መበላሸት ማህበር እና የአውሮፓ የሰርቪካል አከርካሪ ምርምር ማህበር ይፋዊ ህትመት፣ ክፍል 19፣ 129–135፣ doi: 10.1007/s00586-009-1184-5 (2010)።
አልበርት፣ ኤችቢ እና ማኒሽ፣ ኬ. ሞዲክ ከወገብ ዲስክ እብጠቶች በኋላ ለውጦች። የአውሮፓ የአከርካሪ አጥንት ጆርናል፡ የአውሮፓ የአከርካሪ አጥንት ማህበር፣ የአውሮፓ የአከርካሪ አጥንት መበላሸት ማህበር እና የአውሮፓ የሰርቪካል አከርካሪ ምርምር ማህበር ይፋዊ ህትመት 16፣ 977–982፣ doi: 10.1007/s00586-007-0336-8 (2007)።
ኬርትቱላ፣ ኤል.፣ ሉኦማ፣ ኬ.፣ ቬህማስ፣ ቲ.፣ ግሮንብላድ፣ ኤም.፣ እና ካፓ፣ ኢ. የሞዲክ ዓይነት I ለውጦች በፍጥነት የሚራመዱ የዲስክ መበላሸትን ሊተነብዩ ይችላሉ፡ የ1 ዓመት የወደፊት ጥናት። የአውሮፓ አከርካሪ ጆርናል 21፣ 1135–1142፣ doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012)።
ሁ፣ ዚጄ፣ ዣኦ፣ ኤፍዲ፣ ፋንግ፣ ኤክስኪው እና ፋን፣ ሳውዝ ዌልስ የሞዲክ ለውጦች፡- ሊሆኑ የሚችሉ ምክንያቶች እና ለወገብ ዲስክ መበላሸት አስተዋጽኦ። የሕክምና መላምቶች 73፣ 930–932፣ doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009)።
ክሮክ፣ ኤችቪ የውስጥ ዲስክ መሰበር። ከ50 ዓመታት በላይ የዲስክ ፕሮላፕስ ችግሮች። የአከርካሪ አጥንት (ፊላ ፓ 1976) 11፣ 650–653 (1986)።